【摘 要】
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基于PCR的技术是克隆已知DNA片段侧翼序列的最常用方法.到目前为止,这些方法大致可以分为3种类型:反向PCR(inverse PCR)[1～3]、连接介导的PCR(ligation-mediated PCR)[4～9]和随
【机 构】
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北京大学生命科学学院,北京,100871
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基于PCR的技术是克隆已知DNA片段侧翼序列的最常用方法.到目前为止,这些方法大致可以分为3种类型:反向PCR(inverse PCR)[1～3]、连接介导的PCR(ligation-mediated PCR)[4～9]和随机引物PCR(randomly primed PCR)[10～12].反向PCR是使用最早的方法,其原理是用限制性内切酶消化基因组总DNA,然后在连接酶的作用下使酶切产物自身环化,设计一对外向性引物进行PCR扩增已知序列旁侧的DNA片段.
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