Siglec-9V型结构域原核表达载体的构建、鉴定和初步表达

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目的构建重组Siglec-9V型结构域(Siglec-9-V)原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达,初步摸索其可溶性表达的条件,为进-步研究其生物学意义奠定基础。方法合成Siglec-9-V的cDNA序列;通过PCR和TA克隆,构建重组表达载体pET—His6-SUMO—Siglec-9-V,利用酶切和DNA测序鉴定插入序列;将重组细菌用IPTG诱导表达,利用His6标签蛋白特异性染料鉴定蛋白质;通过尝试不同的诱导表达温度,摸索Siglec-9-V可溶性表达的条件。结果证实重组表达载体pET—His6-S
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