怀牛膝治疗湿热痹证有效成分提取及纯化工艺研究

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目的研究怀牛膝中总皂苷成分的提取、纯化工艺,确定牛膝总皂苷类成分体内治疗痛风性关节炎疗效。方法以齐墩果酸为指标,采用单因素考察及正交实验设计确立牛膝总皂苷最佳提取工艺,利用大孔吸附树脂法对牛膝有效成分进行纯化工艺研究。以大鼠足肿胀为指标,对纯化后的牛膝总皂苷治疗痛风性关节炎的作用进行评价。结果牛膝总皂苷最佳提取工艺为以70%乙醇作为溶剂,提取两次,每次提取1 h,加溶剂量12倍。最佳纯化工艺为D101型大孔吸附树脂装柱,径高比约为1∶5,树脂比生药量为1∶0.2上样,上样流速为1.5 BV·h-1,4 BV去离子水和50%乙醇洗脱,洗脱速度为1.5 BV·h-1,50%乙醇洗脱液洗脱部分为牛膝总皂苷。牛膝总皂苷提取物灌胃给药(生药剂量8 g·kg-1),1次/d,连续给药3 d,可明显缓解由弗氏完全佐剂引起的大鼠足趾肿胀。结论牛膝总皂苷经本工艺提取、纯化后,其含量可达55%以上,简单易行,适合工业化生产,牛膝总皂苷对大鼠佐剂性关节炎具有抑制作用,为进一步研究有效成分治疗湿热痹证提供前期试验基础。
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