胸腺素α1基因的克隆表达及其生物活性

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dk_wow
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胸腺素α1(thymosinalpha1,Tα1)作为一种免疫增强剂,临床用途广泛.为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成Tα1基因,克隆于质粒pUC19的EcoRⅠ和PstⅠ位点.经测序证明序列正确后,串联为4串体(Tα1④),经再次测序确认后克隆入pThioHisA的EcoRⅠ和PstⅠ位点.转化大肠杆菌TOP10,酶切鉴定正确后,经1mmol/LIPTG诱导4h,获得硫氧还蛋白与Tα1④的融合表达,用离子交换层析纯化融合蛋白.溴化氰裂解融合蛋白,释放出Tα1单体,经离子交换色谱纯化出Tα1.采用
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为枸建草鱼(Ctenopharyngodon idellus)胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)大肠杆菌表达质粒,对已克隆到的草鱼IGF-Ⅰ基因进行改造.改造后的基因去除了原cDNA的信号肽和E区序列,并