【摘 要】
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目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA) AABR07008568.1在大气PM2.5诱导大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)炎症反应中的作用及其分子机制.方法 采集广州地区现场实时PM2.5样品制成混悬液用
【机 构】
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广西医科大学公共卫生学院,广西南宁530021;生态环境部华南环境科学研究所国家环境保护环境污染健康风险评价重点实验室;右江民族医学院
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目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA) AABR07008568.1在大气PM2.5诱导大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)炎症反应中的作用及其分子机制.方法 采集广州地区现场实时PM2.5样品制成混悬液用于后续实验的染毒,用0、200 μg/ml PM2.5染毒液暴露NR8383细胞24 h后,采用lncRNA高通量测序并结合生物信息学分析方法筛选出有差异表达的lncRNAs,使用实时荧光定量PCR分析法(RT-qPCR)验证测序结果.运用胞浆胞核亚细胞定位试剂盒检测AABR07008568.1在胞浆胞核的分布情况.采用RNA干扰(RNAi)技术敲低NR8383细胞中AABR07008568.1的表达水平,以RT-qPCR检测RNA干扰联合200 μg/ml PM2.5染毒液暴露NR8383细胞后IL-6的表达水平.用NFκB特异性抑制剂(BAY11-7082,10 μmol/L)处理细胞后检测AABR07008568.1的表达水平.结果 高通量测序和RT-qPCR结果显示,随着PM2.5暴露浓度的增加,AABR07008568.1表达量增高(P＜0.05).通过干扰AA BR07008568.1后发现siRNA1的转染效率最高,达到约60％(P＜0.05).敲低AABR07008568.1且联合PM2.5暴露后,与阴性对照(NC)组相比,siRNA1组中IL-6的表达水平降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);NC+PM2.5组中的IL-6表达上调,差异具有统计学意义(P＜0.05).当使用NFκB特异性抑制剂阻断NFκB通路后,AABR07008568.1表达量下降(P＜0.05).结论 AABR07008568.1参与了NFκB通路的激活,但两者之间具体的调控机制尚需更深层次的探索.
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