【摘 要】
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目的 构建人NOD2腺病毒表达载体.方法 采用分子克隆技术,从CoCa2细胞DNA中PCR扩增NOD2片段,经pcD N A 3.1克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV,以Kpn Ⅰ和Not Ⅰ双酶切重组穿梭质粒,
【机 构】
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大理学院临床医学院妇产科教研室,大理学院临床医学院外科教研室
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目的 构建人NOD2腺病毒表达载体.方法 采用分子克隆技术,从CoCa2细胞DNA中PCR扩增NOD2片段,经pcD N A 3.1克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV,以Kpn Ⅰ和Not Ⅰ双酶切重组穿梭质粒,经电穿孔、抗性筛选,重组成pAdCMV-NOD2腺病毒质粒,经酶切鉴定正确后,在H EK 293细胞中包装成为重组rvAdCMV-NOD2腺病毒,并进行PCR鉴定测定.结果 成功扩增目的 基因并鉴定,重组穿梭质粒pShuttle-CMV-NOD2鉴定,经酶切鉴定证实重组腺病毒质粒构建成功.结论 腺病毒载体应用广泛,细菌体内同源重组腺病毒pAdCMV-NOD2合成效率高,为炎症的基因治疗研究奠定基础.
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