【摘 要】
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目的探索GPI锚固蛋白的体外表达,获得具有生物学活性的可溶性游离CD59分子。方法 通过PCR选择性扩增编码成熟CD59氨基酸序列的基因片段,并将之克隆入PinPoint Xa—3质粒中。IPT
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目的探索GPI锚固蛋白的体外表达,获得具有生物学活性的可溶性游离CD59分子。方法 通过PCR选择性扩增编码成熟CD59氨基酸序列的基因片段,并将之克隆入PinPoint Xa—3质粒中。IPTG诱导融合蛋白表达,产物经亲和素树脂亲和层析。在体外微量反应性溶血抑制实验中检测重组CD59纯化样品的生物学活性。结果 筛选得到的重组子诱导后表达分子量约为22kD的生物素化CD59融合蛋白。亲和素树脂纯化得到高纯度的蛋白样品。纯化分子在反应性溶血实验中表现出溶血抑制活性。结论 本研究对体外表达无GPI—锚的可溶性游离CD59分子进行了表达探索,获得具一定生物学活性的游离重组CD59,为进一步研制应用型CD59活性分子打下基础。
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