胡萝卜根特异表达水通道蛋白基因DcRB7的分离及其启动子功能分析

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从胡萝卜胚cDNA文库中分离得到一条完整的cDNA片段,序列分析表明属于水通道家族新成员,并与烟草根特异性表达TobRB7基因高度同源,因此命名为DcRB7.Northern杂交分析表明DcRB7在根中特异性表达.利用反向PCR技术,分离获得了DcRB7基因上游约650bp的片段.将此片段与含有GUS报告基因表达载体进行重组构建后,以农杆菌介导转化烟草获得相应的转基因植株.在对转基因烟草的GUS表达特性进行了组织化学鉴定和荧光定量分析后发现,该调控区段能指导GUS基因在烟草根中优势表达,并表现出干旱诱导的特性. A complete cDNA fragment was isolated from carrot embryo cDNA library and sequenced to show that it belongs to a new member of the aquaporin family and is highly homologous to the tobacco root-specific expression TobRB7 gene, hence the name DcRB7.Northern hybridization analysis showed that DcRB7 was found in roots Specific expression.Using reverse PCR technology, we obtained a fragment of about 650 bp upstream of DcRB7 gene.After recombination with this fragment containing the GUS reporter gene expression vector, the corresponding transgenic plants were transformed with Agrobacterium tumefaciens The GUS expression characteristics of transgenic tobacco were characterized by histochemistry and fluorescence quantitative analysis. It was found that the GUS gene was predominantly expressed in tobacco roots and showed drought-induced characteristics.
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