日本沼虾基因片段PCR扩增的条件优化

来源 :华东师范大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：hyt1217

【摘要】

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以日本沼虾肌肉组织为材料，提取其基因组DNA，研究了该虾16S rRNA基因片段扩增的PCR反应条件．经对扩增反应体系中各因子和扩增程序的梯度实验。确定优化反应条件为：在25μL反应体

【作者】

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赵晓勤倪娟陈立侨顾志敏周志明

【机构】

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华东师范大学生命科学学院,浙江省淡水水产研究所

【出处】

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华东师范大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2006年2期

【关键词】

：

日本沼虾 PCR 优化 Macrobrachium nipponensis polymerase chain reaction optimization

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以日本沼虾肌肉组织为材料，提取其基因组DNA，研究了该虾16S rRNA基因片段扩增的PCR反应条件．经对扩增反应体系中各因子和扩增程序的梯度实验。确定优化反应条件为：在25μL反应体系中，10×Buffer 2．5μL，DNA模板200-300ng，4×dNTP 0．2mmol／L，Mg^2＋ 1．5mmol／L，引物0．4μmol／L，TaqDNA聚合酶1U，95℃预变性5min；接着35个循环包括95℃变性1min，56℃复性50s，72℃延伸1min；最后72℃延伸10min．

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