【摘 要】
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目的:从乳腺癌MDA-MB-231细胞中分离外泌体并分析其来源及分子生物学特征。方法:采用多步差速离心的方法从乳腺癌MDA-MB-231细胞中分离外泌体,并在原子力显微镜下观察其形态;
【机 构】
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上海交通大学系统生物医学研究院,系统生物医学教育部重点实验室,上海交通大学生物医学工程学院,
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目的:从乳腺癌MDA-MB-231细胞中分离外泌体并分析其来源及分子生物学特征。方法:采用多步差速离心的方法从乳腺癌MDA-MB-231细胞中分离外泌体,并在原子力显微镜下观察其形态;采用RT-PCR法检测其特异性的微小RNA(micro RNA,miR)-21的表达;蛋白质印迹法检测其标记物Flotillin-1蛋白的表达。结果:从乳腺癌MDA-MB-231细胞中分离获得外泌体,形态为圆形或椭圆形,大小不一,直径约在30～100nm;RT-PCR检测结果显示,外泌体中有miR-21的表达;蛋白质印迹法检测结果显示,外泌体中有Flotillin-1蛋白的表达。结论:多步差速离心是一种较为简单有效的外泌体提取方法。从形态及分子生物学特征方面证实,本研究中所获得的提取物正是乳腺癌MDA-MB-231细胞释放的外泌体。
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