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采用液氮气熏蒸法，解决了玻璃化冷冻解冻过程中因急速降温和升温使胚胎遭受物理性损伤，导致透明带破裂而死亡这一关键性问题。结果在20或25℃室温下，使用EFS40或GFS40玻璃化溶液二步法冷冻保存的胚胎，解冻后透明带损伤率为0％，胚胎发育率近100％，囊胚孵化率超过80％，与对照组相比无显著性差异（P＞0．05）。冷冻胚胎经移植后其妊娠率和产仔率（70％，60％和77％，72％）与对照组（86％和61％）相比无显著性差异（P＞0．05）。