具有新霉素抗性的小鼠胚胎成纤维细胞的分离及饲养层制备

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【摘要】

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目的:建立一种操作简便,并能高效获得高质量的具有新霉素抗性(neo)的C57BL/6J小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast cells,MEF细胞)的分离培养方法;所得细胞经过丝

【作者】

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刘青青

【机构】

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苏州大学剑桥-苏大基因组资源中心

【出处】

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科教导刊(电子版)

【发表日期】

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2019年27期

【关键词】

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新霉素 MEF细胞 mESC 丝裂霉素C 饲养层

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目的:建立一种操作简便,并能高效获得高质量的具有新霉素抗性(neo)的C57BL/6J小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast cells,MEF细胞)的分离培养方法;所得细胞经过丝裂霉素C处理后能作为饲养层细胞支持小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESC)的生长和neo抗性筛选。方法:取12.5-14.5d的胎鼠躯干部剪碎成糊状,利用Collagenase type IV和Trypsin的消化作用获得原代MEF细胞。使用丝裂霉素C处理

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