共转化法获得无筛选标记的转PEPC、PPDK基因水稻恢复系纯合体

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用根癌农杆菌共转化的方法将pSB130/CK质粒[目的基因磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PEPC)、磷酸丙酮酸二激酶基因(PPDK)与筛选标记潮霉素抗性基因HPT分别构建于2个T—DNA区]导入水稻恢复系R299,经PCR、Southern检测,筛选到T0代13个转基因植株。对T1~T3代转基因后代进行PCR跟踪鉴定,分离出无潮霉素抗性基因的转基因植株(PEPC^+ PPDK^+ HPT^-),分离株系比率为15%~21%,分离株系中PEPCP^+ PPDK^+ HPT^-型单株分离频率为7.2%~10.0
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