【摘 要】
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[目的]基于人精液DNA试剂盒提取法,优化家畜冷冻精液DNA纯化方法,探讨冷冻精液中影响DNA提取质量的因素。[方法]使用摩拉水牛冷冻精液,按100μL(或200μL)样品初始量,以及0.5
【机 构】
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南京农业大学食品科学技术学院,南京农业大学动物科技学院,南京农业大学动物科学类国家级实验教学示范中心,南京农业大学农业农村部牛冷冻精液质量监督检验测试中心（南京）
【基金项目】
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国家重点研发计划项目(2018YFC1200201);江苏省自然科学基金项目(BK20160722);国家自然科学基金项目(31701229);中央高校基本科研业务费专项资金(KYZ201723,KJQN201829)
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[目的]基于人精液DNA试剂盒提取法,优化家畜冷冻精液DNA纯化方法,探讨冷冻精液中影响DNA提取质量的因素。[方法]使用摩拉水牛冷冻精液,按100μL(或200μL)样品初始量,以及0.5、1、1.5、2、3和5 h的蛋白酶解时间,用试剂盒法纯化DNA。从DNA产物浓度、A 260/A 280和A 260/A 230值3方面,结合琼脂糖凝胶电泳和PCR检测进行分析,最终确定DNA纯化的最佳精液初始量以及最佳蛋白质酶解时间。在此基础上,纯化67份来源于牛、马、驴等不同家畜品种的冷冻精液DNA,同时测定每份
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