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目的:构建雌激素受体(ER)α基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,检测病毒感染细胞的滴度。方法:针对已经筛选确定的ERα基因RNAi有效靶序列。合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoRⅠ酶切后的pGCsil—GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生shERα-LV慢病毒载体,PER筛选阳性克隆。测序鉴定。用shERα-LV载体、pHelper 1.0载体和pHelper 2.0质粒共转染包装293T细胞。包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水