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目的：构建二氢叶酸还原酶（dyhidrofolatereductase，DHFR）基因RNA干扰质粒载体，为探讨抑制DHFR基因表达在卵巢癌铂类耐药治疗中的意义奠定基础。方法：设计DHFR基因靶向的发夹状siRNA，筛选出最佳siRNA沉默片段，退火后连接人pGPu6／GFP／Neo载体，转化后进行序列鉴定，脂质体转染SKOV3细胞株，并进行荧光摄像。结果：将退火后的双链寡核苷酸片段连接到pGPU6／GFP／Neo载体，测序结果正确。转染SKOV3细胞后，PCR鉴定干扰效果，G418筛选稳定细胞株。结论：