【摘 要】
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通过研究4种多元醇(海藻糖、甘露醇、山梨糖和蔗糖)对全人源抗VEGF165单克隆抗体(HVAB)构象及胶体稳定性的影响,筛选出最优的HVAB稳定剂并探讨多元醇稳定抗体的作用机制。该
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通过研究4种多元醇(海藻糖、甘露醇、山梨糖和蔗糖)对全人源抗VEGF165单克隆抗体(HVAB)构象及胶体稳定性的影响,筛选出最优的HVAB稳定剂并探讨多元醇稳定抗体的作用机制。该研究运用差示荧光扫描法(Differential scanning fluorimetry,DSF)判断多元醇对抗体热稳定性的影响;采用圆二色光谱(Circular dichroism,CD)和二阶导数色氨酸荧光光谱探讨多元醇对抗体构象稳定性的影响;聚乙二醇诱导抗体发生液-液相分离现象判断多元醇对抗体胶体稳定性的影响。结果表明4种多元醇均能提高抗体的热稳定性及胶体稳定性;多元醇作为辅料添加到溶液中会引起抗体构象发生变化,圆二色谱结果显示HVAB二级结构发生变化,但仍然以β-折叠为主;海藻糖和甘露醇引起HVAB发生去折叠,并未引起抗体发生聚集或片段化,同时提高了抗体的胶体稳定性;山梨糖提高抗体Tm值效果最明显,在稳定抗体胶体结构方面也表现突出,且作为添加剂对抗体二级结构影响最小。说明抗体的构象稳定性和胶体稳定性相互影响;山梨糖可作为HVAB的最优稳定剂。
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