探讨重组微小腺病毒载体(miniAd－ATP7B－GFP)对高铜孵育下的Wilson病患者皮肤成纤维细胞铜代谢的影响。
方法构建含人ATP7B基因的微小腺病毒载体；检测8例Wilson病患者突变基因；原代培养8例Wilson病患者与8名健康对照的皮肤成纤维细胞，使用基本培养液及铜浓度为22.3(C1)、89.2(C2)、156.1(C3)、245.3 μmol/L(C4)培养液分别孵育2组细胞72 h，检测铜与蛋白含量。向Wilson病患者成纤维细胞分别转染miniAd－ATP7B－GFP(miniAd－ATP7B－GFP组)与空载体(miniAd－GFP组)，设立Wilson病未转染组及健康组做对照，用C4浓度培养液孵育4组细胞72、96 h，后检测各组细胞铜与蛋白含量。
结果8例Wilson病患者检出5种突变基因，基本培养液及C1～C3组Wilson病患者与健康人铜/蛋白比值差异无统计学意义，C4组Wilson病患者[(1 871.6±209.2) ng/mg]与健康人[(1 267.2±188.3) ng/mg]铜/蛋白比值差异有统计学意义(t＝6.075，P<0.01)，C3[(816.3±113.9) ng/mg]、C4组较基本培养液组[(159.2±38.6) ng/mg]差异有统计学意义(患者组χ2＝31.493，健康组χ2＝30.708，均P<0.01)。96 h各组铜/蛋白比值均高于72 h组，96 h [(2 071.0±171.8) ng/mg]、72 h[(1 495.5±161.4) ng/mg]的miniAd－ATP7B－GFP组铜/蛋白比值与Wilson病未转染组[96 h(2 731.2±188.7) ng/mg、72 h(1 901.7±219.5) ng/mg]相比差异有统计学意义(72 h组F＝20.130，96 h组F＝51.496，P<0.01)，与健康组比差异亦有统计学意义。
结论MiniAd－ATP7B－GFP对高铜孵育下的Wilson病患者皮肤成纤维细胞的铜代谢有部分改善作用。