【摘 要】
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目的 研究生长激素释放肽(ghrelin)对胰岛β细胞(NIT-1)增殖的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用不同浓度的ghrelin在不同时间内对NIT-1细胞进行刺激,以噻唑蓝(MTT)法观察ghrelin对NIT-1细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测ghrelin对细胞周期的影响;采用免疫印迹法(Western blot)分析细胞外信号调节激酶(ERK1/2)表达水平和ERK1/2磷酸化水
【机 构】
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100083,北京大学第三医院检验科,100083,北京大学第三医院检验科,100083,北京大学第三医院检验科,100083,北京大学第三医院检验科
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目的 研究生长激素释放肽(ghrelin)对胰岛β细胞(NIT-1)增殖的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用不同浓度的ghrelin在不同时间内对NIT-1细胞进行刺激,以噻唑蓝(MTT)法观察ghrelin对NIT-1细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测ghrelin对细胞周期的影响;采用免疫印迹法(Western blot)分析细胞外信号调节激酶(ERK1/2)表达水平和ERK1/2磷酸化水平.结果 随着ghrelin浓度的增加和作用时间的延长,发现其有促进NIT-1细胞增殖的作用.ghrelin作用于NIT-1细胞48 h后,改变细胞S期所占比例,ghrelin浓度为0、10-9、10-8、10-7 mol/L时,对应的S期细胞所占比例分别为(34.5±6.5)%、(42.1±7.4)%、(50.6±5.8)%、(71.4±9.4)%.ghrelin处理NIT-1细胞后,ERK1/2出现磷酸化,且磷酸化水平与ghrelin浓度呈剂量-效应关系.结论 ghrelin通过激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/ERK1/2途径,影响细胞周期,促进胰岛β细胞增殖。
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