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目的
观察ARHI基因转染胰腺癌PANC1细胞后对趋化因子及其受体相关基因mRNA表达的影响。
方法采用脂质体法将表达ARHI基因的质粒pLNCX2-ARHI-EGFP、空质粒pLNCX2-EGFP转染胰腺癌PANC1细胞,应用G418筛选稳定转染细胞株。采用基因芯片RT2 Profiler™PCR Array行实时定量PCR,分析转染细胞的基因表达,包括84个趋化因子及受体相关基因,采用Real-time PCR法验证与血管生长相关基因mRNA的表达。
结果ARHI转染组细胞有36个基因mRNA表达下调,9个基因mRNA表达上调,39个基因mRNA表达变化无意义。其中肿瘤转移和侵袭相关基因CXCL12、CXCR4表达显著下调(<-6倍),MMP-2表达轻度下调(<-2倍);促肿瘤血管生成相关基因CCL2、CXCL1、CXCL2、CXCL8、CXCL12、CXCR4表达显著下调,CXCL3、CCR1、CCR2表达轻度下调;抗肿瘤血管生成相关基因CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCR3表达显著上调(>6倍);远端器官定位浸润和潜伏相关基因CXCL12、CXCR4、CCR7表达显著下调,CXCR5表达轻度下调;肿瘤免疫调节相关基因CXCL8、CXCR1、CCR7表达显著下调。Real-time PCR验证CXCL1、CXCL8、CXCR4、CXCR3结果与PCR Array检测结果一致。
结论ARHI基因可抑制胰腺癌细胞增殖、转移、血管生成、免疫调节相关趋化因子及其受体的基因表达。