【摘 要】
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目的研究重组人IL-24蛋白(rhIL-24)选择性诱导肝癌细胞生长抑制和凋亡的作用。方法重组由Igk前导肽、IL-24 cDNA(不含自身信号肽)和myc-tag组成的融合基因(Igk7m),构建表达载
【机 构】
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第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室
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目的研究重组人IL-24蛋白(rhIL-24)选择性诱导肝癌细胞生长抑制和凋亡的作用。方法重组由Igk前导肽、IL-24 cDNA(不含自身信号肽)和myc-tag组成的融合基因(Igk7m),构建表达载体pcDNA3.1-Igk7m,稳定转染293细胞,表达并粗提分泌性rhIL-24蛋白。以人肝癌细胞株PLC/PRF/5(p53突变型)、SMMC-7721(p53野生型)和正常人肝细胞株WRL-68为靶细胞,用活细胞计数法和TUNEL法分析rhIL-24处理对培养的靶细胞生长和凋亡的影响。结果经测序鉴定,融合基因各片段的核苷酸序列和总阅读框架完全正确。应用Western blot在筛选的转基因293细胞克隆和其培养上清中均检测到rh IL-24蛋白,分子量分别约为25 kDa和35 kDa。与WRL-68对照组相比,分泌性rhIL-24蛋白粗提液处理可显著抑制PLC/PRF/5和SMMC-7721肝癌细胞的生长增殖(P<0.01)。rhIL-24蛋白处理还可显著增加PLC/PRF/5和SMMC-7721的凋亡细胞百分率(P<0.01),而对正常肝细胞WRL-68无明显影响(P>0.05)。结论rhIL-24蛋白能选择性诱导培养的肝癌细胞株PLC/PRF/5和SMMC-7721生长抑制和凋亡。
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