目的：探讨健脾复方胃肠安对人胃癌MKN45细胞自噬的影响，探讨其抗肿瘤的作用机制。方法：体外培养人胃癌MKN45细胞，采用细胞活力检测法（CCK-8）检测不同质量浓度胃肠安(250,500,1 000,2 000 mg·L^-1)作用体外培养的人胃癌细胞MKN45细胞，共孵育24,48,72 h，检测细胞增殖活力的改变；采用吖啶橙（AO）染色和单丹磺胺戊二胺（MDC）染色观察胃肠安对胃癌MKN45细胞自噬小体及自噬囊泡的变化；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测微管相关蛋白1轻链3（LC3），酵母ATG6同源物（Beclin1），泛素结合蛋白-1（p62），自噬相关基因5（ATG5），自噬相关基因7（ATG7）mRNA和蛋白的表达。结果：CCK-8实验显示，与空白组比较，胃肠安(500,1 000,2 000 mg·L^-1)可明显抑制MKN45细胞的增殖能力（P<0.05，P<0.01）；AO和MDC染色显示，与空白组比较，随胃肠安浓度的增加，自噬小体和自噬囊泡含量逐渐增加；Real-time PCR和Western blot结果显示，与空白组比较，胃肠安(1 000mg·L^-1)组细胞中自噬相关蛋白LC3-II，Beclin1，ATG5，ATG7 mRNA和蛋白表达升高（P<0.05），p62表达下降（P<0.05，P<0.01）。结论：胃肠安可诱导人胃癌MKN45细胞自噬，其机制涉及上调自噬相关基因Beclin1，ATG5，ATG7 mRNA和蛋白表达，下调p62 mRNA和蛋白表达，促进自噬标志蛋白LC3-I向LC3-II转化。