【摘 要】
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目的:用一种简便方法构建了含血小板第四因子(PF4)cDNA的腺病毒载体,体外检测其抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活性.方法:将含有信号肽的PF4cDNA克隆至腺病毒穿梭质粒pAdshuttl
【机 构】
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中国医学科学院协和医科大学血液学研究所血液病医院中法实验室
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目的:用一种简便方法构建了含血小板第四因子(PF4)cDNA的腺病毒载体,体外检测其抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活性.方法:将含有信号肽的PF4cDNA克隆至腺病毒穿梭质粒pAdshuttle-CMV中,形成转移质粒pAdshuttle/PF4,将之用PmeI酶切线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,抽提并鉴定含目的基因的重组体质粒,PacI酶切后用磷酸钙共沉淀方法转染HEK293细胞,包装成重组腺病毒AdPF4.经鉴定后扩增、纯化、测病毒滴度及感染率.直接转导HUV
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