长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库的构建

来源 :甘肃农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yjqwml
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为了克隆和研究具有免疫原性的长角血蜱基因。应用建库试剂盒成功构建了长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库.在无Rnase污染的环境下摘取半饱血长角血蜱雌蜱唾液腺。并从中提取RNA,进而纯化mRNA。利用oligo(dT)引物反转录合成双链cDNA,并在其两端加EcoRⅠ/HindⅢ定向接头并酶切,过柱分级分离后。将cDNA分子定向连接到具有EcoRⅠ/HindⅢ粘性末端的λSCREEN载体中.经体外包装转染E.coliERl647宿主菌,进行文库容量测定和扩增.以扩增文库的DNA为模板。利用载体通用引物检测c
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