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目的:探讨利用长期冷冻的废弃胚胎建立人胚胎干(hES)细胞系.方法:将临床体外受精(IVF)及精子卵浆内注射(ICSI)周期中剩余冷冻5年以上的废弃胚胎复苏后继续培养至扩张囊胚,链霉蛋白酶去除透明带后采用全囊胚培养法获取原代类胚胎干细胞,再用机械法传代分离纯化hES细胞,命名为NS1.取不同代次的培养细胞,进行碱性磷酸酶染色、转录因子OCT-4、阶段特异性胚胎抗原SSEA-4、肿瘤排斥抗原TRA-1-60、TAR-1-81、核型及体内分化实验对NS1进行全能性鉴定.结果:12枚废弃胚胎在体外继续培养后,有