羊伪结核病免疫方法的研究

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  [摘 要] 羊伪结核病是一种由伪结核棒状杆菌引起的一种人畜共患慢性传染性疾病,患病后显著的临床特征是在淋巴和肺脏等组织器官内形成干酪状脓肿,也被称为干酪样淋巴结炎。该种疾病对任何品种羊都具有传染性,引起羊机体消瘦、生产能力下降,妊娠母羊出现流产、死胎、僵尸胎,患病严重的造成母羊死亡。由于这种疾病外在症状不明显,死亡率低,所以饲养户经常忽视该种疾病预防和免疫。最近几年,随着对羊伪结核病的诊断、预防、免疫的深入研究,并结合国内外研究现状,就羊伪结核病免疫方法进行分析及阐述。
  [关键词] 羊养殖 伪结核病 免疫方法 研究分析
  [中图分类号] S826 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 (2016)05-0261-01
  羊伪结核病是由伪结核棒状杆菌引起的一种人畜共患慢性传染性疾病。显著临床特征是在淋巴结和肺脏中出现干酪状脓肿,现阶段,对羊伪结核病还没有有效的诊断方法,为此,本文主要就羊伪结核病的免疫方法进行了研究,现将研究结果哟报告如下:
  1 实验材料和实验方法的选取
  1.1 实验材料的选取
  本次研究选取了新疆托里县某羊养殖场内健康山羊和绵羊各12只,研究日期一共六个月,从2015年4月到2015年9月。测试羊的年龄为1~2年。本次研究过程羊的品种、年龄是之间的差异性无统计学意义。
  1.2 实验菌株的获取
  取自然患病山羊干酪状脓肿,通过粉碎,离心处理,分离得到了羊伪结核病棒状杆菌,将是分离得到二号菌株和十二号菌株经过处理后用作菌苗制备,而九十九号菌株作为免疫攻毒实验菌株,用马红球菌用作菌苗制备的辅佐材料。
  1.3 菌苗制备
  将二号菌株和十二号菌株接种到肉汤培养基上,在培养室内培养一周,温度恒定在37度左右。然后将培养基混合在一起,加入0.4%的甲醛溶液进行灭活处理一周,将上层清液去除,保证沉淀物和上层清液比例维持在1:4左右,然后将辅助马红菌株加入混合物中,选取上层清液作测试菌株,将其放置于4度的培养环境下等待使用。
  1.4 测试羊免疫接种
  本次选择的测试羊年龄在1~2岁之间,通过对羊进行血清检测,伪结核病呈现阴性,羊只身体健康,无其他疾病。将上述过程得到了灭火菌株以每只2ml的量注射到到测试羊的体内,接种部位都为左环耳部皮内注射。本次研究过程六只山羊和六只绵羊不进行免疫接种,将其作为对照试验。
  1.5 攻毒实验
  攻毒实验研究过程中选取了将山羊和绵羊分为两组进行测试,详细的情况见表1所示。
  1.6 临床检查
  在对山羊进行免疫接种和攻毒实验之后,要定期对测试羊进行体温和临床症状检查,要详细记录羊的身体体征变化情况和全身反应。每周定期采集测试羊的血液,进行伪结核病抗血清检测。
  2 实验结果分析
  2.1 测试羊免疫反应分析
  测试羊接种灭火菌株三天之后,都出现了体温显著升高的症状,羊精神萎靡、进食量减退,大量饮水,症状在接种一周后逐渐消失。通过对测试羊接种部位进行观察分析,测试羊的接种部位出现了急性炎症反应,持续时间比较长,而且有的羊呈现加重趋势。4~5周左右,炎症逐渐消退,并在接种灭火菌株的部位出现了黄豆大小的硬质结节,一般两周后住结节逐渐缩小消退。测试羊接种两周之后,血清检测出现了抗体阳性反应。持续时间大概13周左右,然后转为阴性,免疫接种第三周,从接种羊血液中就能够检测到淋巴细胞和分页核细胞呈现不同程度的增多现象,持续时间为7~12周左右。
  2.2 攻毒反应
  攻毒三天后,测试两组羊均出现了不同程度的全身反应,羊的体温显著升高,精神沉郁,食欲减退,对照组山羊和绵羊比免疫羊的症状表现的更为明显,并且持续时间较长,对照组山羊和绵羊持续时间为3~4周左右,免疫羊持续时间大概为1周左右。对照组羊身体消瘦十分明显,免疫羊症状出现三周后逐渐消退,并且身体素质逐渐恢复。攻毒测试三天之后,免疫羊和对照组羊都出现了皮肤炎症反应,逐渐形成了花生豆大小的脓包,对照组羊的脓包消退时间比较长,一般在6~8周左右开始才会逐渐消退,并且会在免疫部位形成疤痕。免疫羊脓包消除时间一般为4~6周左右。
  3 讨论
  伪结核病是羊养殖过程中一种常见的而慢性传染性疾病,伪结核棒状杆菌寄生在羊体内后所产生的溶血毒素对羊的淋巴结和肺脏器官产生危害,形成化脓性的坏死组织,因此,严重影响到羊的生长和发育。羊患病之后无明显的外表临床症状,机体消瘦,饲养户很容易将其与寄生虫疾病混淆。羊的生产能力逐渐降低,会给饲养户造成严重的经济损失。该种疾病在世界范围广泛发生。在我国羊养殖地区也广泛存在,该种疾病还会给传染给人力,给人类生命健康造成威胁。因此,为了更好防治该种疾病,很多畜牧兽医研究人员积极尝试疫苗的研制,试图解决该种疾病所产生的免疫问题,但是从最近几年的研究结果显示,不容乐观。随着科学技术不断发展和进步,我们发现伪结核棒状杆菌机体所产生的抗体能够有效抑制病菌生长和繁殖,而且还能够中和病菌所产生的溶血毒素。通过对本次研究结果进行分析发现,本次制备的灭活菌株具有较高的免疫原性,通过耳背部接种注射之后,能够激发羊机体对伪结核棒状杆菌产生大量的免疫抗体,形成坚强的免疫能力。通过日常记录可以发现,接种四周之后,免疫羊身体内的抗体可以抵抗2*108个该病菌的攻击。接种六个月后可以对更高数量的该病菌产生攻击力,免疫时间较长。本次研究发展,有两只免疫羊接种灭活菌株之后,肺部和淋巴结脓肿病变分别被局限于攻毒部位或者临近的淋巴结附近。这种现象表明当羊身体内存在大量病菌时,经过免疫的羊仍然可以有效的抵抗病原菌在身体内的扩散和传播,最大程度的保护羊的内脏器官健康。但是本次研究对于羊身体内的脓肿是否经过一段时间后可以被疾病彻底消除需要做进步一的研究和探索。
  参考文献
  [1]赵宏坤,范伟兴,胡敬东,张志. 羊伪结核病研究进展[J]. 中国预防兽医学报,2000,03:77-78.
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