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1969年美国耶鲁大学Gall和Pardue首先创立了原位杂交技术,确定了爪蟾核糖体基因定位于卵母细胞的核仁中.与此同时,Buongiorno-Nardelli和A maldi John及其同事等相继利用同位素标记核酸探针进行了细胞或组织的基因定位.Orth应用3H标记的兔乳头状瘤病毒cRNA探针进行了兔乳头状瘤组织的冰冻切片进行杂交,首次用原位杂交技术检出病毒DNA在细胞中的定位.