人髓核细胞分离、传代培养方法的建立及意义

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：a226959

【摘要】

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目的建立一种体外分离、培养人髓核细胞（NPCs）的新方法,并探讨其意义。方法采用0.2%Ⅱ型胶原酶消化法分离人正常NPCs,单层贴壁法进行传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态。取第1

【作者】

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李大鹏吴燕黄永辉蒋璐孙继芾岳佳伟

【机构】

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江苏大学附属医院,江苏大学

【出处】

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山东医药

【发表日期】

：

2017年32期

【关键词】

：

髓核细胞 Ⅱ型胶原酶消化法单层贴壁法细胞培养椎间盘退变 nucleus pulposus cells type Ⅱ collagenase digest

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（81601931）, 江苏省自然科学基金资助项目（BK20150475）

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目的建立一种体外分离、培养人髓核细胞（NPCs）的新方法,并探讨其意义。方法采用0.2%Ⅱ型胶原酶消化法分离人正常NPCs,单层贴壁法进行传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态。取第1、2、3代NPCs,采用CCK-8法检测细胞增殖能力（以吸光度值表示）,连续检测12天。取第2代NPCs,采用免疫组化法检测Ⅱ型胶原（Col-2）、细胞角蛋白18（KRT-18）、KRT-19、低氧诱导因子1α（HIF-1α）、葡萄糖转运子1（GLUT-1）、Sox-9、聚集蛋白聚糖（ACAN）、CD24阳性表达率。结果分离的N

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