PCR-小卫星DNA指纹图在异基因造血干细胞移植植活指标监测中的应用

来源 :中华医学遗传学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ufo0101
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为了解异基因骨髓移植治疗某些遗传及恶性血液性疾病的植活监测指标,用聚合酶链式反应(PCR)扩增具有高度多态性的小卫星DNA33.1、33.6位点,联合地高辛标记的位点特异性寡核苷酸探针杂交的方法,以小卫星DNA指纹图为特异性遗传标志,对6例异基因骨髓移植,1例脐血移植进行植活指标监测,6例获得供者源性细胞植活证据。结果显示:小卫星DNA指纹图个体特异性强,可作为监测异基因造血干细胞移植植活的可靠指标,尤其是同血型,同性别,HLA配型表型全相合的移植;该方法程序简单,操作方便,灵敏度高,可达0.5%,最早获得植入证据的时间是+15天,仅需模板DNA100ng;如果扩增位点增加,可提高个体识别能力。

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应用Southern杂交、PCR扩增、DNA序列分析技术对7例46,XY女性性反转综合征患者的SRY基因进行了研究。结果表明:一例缺失SRY基因;一例存在codon 76 CGC→CCC点突变;另一例存在codon 94 CTG→CCG的点突变;其余4例与正常成年男性的SRY基因相同。为研究46,XY女性性反转综合征的发病机理提供了有价值的资料。
应用多重等位基因特异PCR方法检测分析了30个苯丙酮尿症家系的5种苯丙氨酸羟化酶基因点突变:外显子7(Arg243Gln),外显子12(Arg413Pro),外显子3(Arg111Term),外显子11(Tyr356Term)和外显子6(Tyr204Cys)。结果表明,这五种突变占PKU基因的46.6%,其中最常见的突变为前两种,分别占23.3%和10.0%。完成了1例PKU风险胎儿的产前诊断。
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