【摘 要】
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通过观察吐温80对RBL-2H3细胞的诱导脱颗粒作用,以初步探讨吐温80导致类过敏反应的可能机制。采用不同浓度的吐温80溶液与RBL-2H3细胞共孵育,ELISA和生化法测定过敏活性物质
【机 构】
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北京中医药大学基础医学院,中国中医科学院西苑医院实验研究中心,
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通过观察吐温80对RBL-2H3细胞的诱导脱颗粒作用,以初步探讨吐温80导致类过敏反应的可能机制。采用不同浓度的吐温80溶液与RBL-2H3细胞共孵育,ELISA和生化法测定过敏活性物质组胺和β氨基己糖苷酶释放率,AnnexinV-FITC荧光抗体染色法(流式细胞仪检测和荧光显微镜观察)检测细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻情况;结果250、1250、6250mg/L吐温80溶液均可以导致RBL-2H3细胞组胺和β氨基己糖苷酶释放率增加(P<0.05或P<0.01),呈浓度依赖性;流式细胞仪检测和荧光显微镜观察发现此3个浓度吐温80可以导致RBL-2H3细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻增加(P<0.01),且呈浓度依赖性;使用含钙与不含钙缓冲体系进行孵育。结果显示,β氨基己糖苷酶释放率没有显著性差异(P>0.05)。吐温80可以在不依赖细胞外游离钙离子的情况下直接诱导肥大细胞脱颗粒,释放活性介质,这可能是其导致类过敏反应的重要原因之一。
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