【摘 要】
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目的 探讨合成的转录反式激活因子－脑源性神经营养因子（TAT-BDNF）融合蛋白对急性脊髓损伤的神经保护作用。方法采用分子克隆方法构建表达载体pTAT—HA—BDNF，原核表达获得TAT—BDNF融合蛋白。尾静脉注射TAT—BDNF4Ii后，通过免疫荧光组织化学染色和WesternBlot分析融合蛋白转导至大鼠中枢神经系统内的分布情况。制作大鼠急性压迫性脊髓损伤模型，分为两组：对照组注射生理盐水，
【机 构】
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南方医科大学南方医院脊柱骨科,广州510515,南方医科大学南方医院脊柱骨科,广州510515,南方医科大学南方医院脊柱骨科,广州510515,第四军医大学神经科学研究所
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目的 探讨合成的转录反式激活因子－脑源性神经营养因子（TAT-BDNF）融合蛋白对急性脊髓损伤的神经保护作用。方法采用分子克隆方法构建表达载体pTAT—HA—BDNF，原核表达获得TAT—BDNF融合蛋白。尾静脉注射TAT—BDNF4Ii后，通过免疫荧光组织化学染色和WesternBlot分析融合蛋白转导至大鼠中枢神经系统内的分布情况。制作大鼠急性压迫性脊髓损伤模型，分为两组：对照组注射生理盐水，实验组注射TAT-BDNF，于损伤后第3天用TUNEL染色观察分析细胞凋亡，通过伤后7dBBB后肢运动功能评分评价TAT—BDNF是否具有减轻脊髓神经功能丧失的作用。结果免疫荧光组织化学染色和WesternBlot分析均证实TAT．BDNF能够穿过血脑屏障分布至中枢神经系统各层组织细胞中。在脊髓急性压迫性损伤模型中，与对照组比较，实验组能减少神经细胞凋亡（P〈0．05）。实验组大鼠伤后3、5、7d的BBB后肢运动功能评分分别为（0．96±0．21）、（3．45±0．81）、（8．06±1．44）分，而对照组分别为（0．58±0．20）、（1．92±0．83）、（3．50±1．64）分，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论TAT—BDNF融合蛋白经静脉给药能通过血脑屏障并减轻脊髓继发性损伤，改善神经功能。
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