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目的
观察在膀胱癌细胞中微小RNA(miRNA,miR)-100对靶基因S100A4的调控及细胞迁移的影响。
方法基于Sanger数据库对miR-100进行靶基因预测,利用慢病毒Lenti-miR-100、Lenti-shS100A4感染膀胱癌细胞EJ、T24,应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western blot检测S100A4 mRNA和蛋白的表达,并通过Transwell迁移实验检测高表达miR-100及敲低S100A4对膀胱癌细胞EJ、T24迁移能力的影响。
结果RT-qPCR和Western blot表明,与对照细胞比较,高表达miR-100膀胱癌细胞EJ、T24中S100A4表达水平明显受到抑制(P< 0. 01),细胞的迁移数为(130. 0±3. 2)个,明显低于对照组[(450. 0±1. 5)个,P< 0. 01];S100A4基因沉默可明显抑制膀胱癌细胞EJ、T24迁移能力,为(137. 0±5. 3)个(P< 0. 01)。
结论miRNA-100可通过下调S100A4表达抑制膀胱癌细胞迁移。