HCV、NS5A区部分基因克隆和序列分析

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目的研究输血后肝炎病人的基因型,探讨HCV抵抗IFN疗效的作用机制.方法以RT-PCR从慢性丙肝病人血清中扩增一段486 bp的cDNA片段作目的基因,插入PQE30的多克隆位点,构建重组质粒PQE30-NS5A-1U1D.结果应用限制酶酶切和测序分析,证实PQE30-NS5A-1U1D中克隆基因是HCVJ的NS5A部分序列,核苷酸和氨基酸序列同源性均在90%以上,包含有干扰素敏感决定区(ISDR).结论血清学抗体检测NS5A片段对HCV诊断有独特的应用价值,有助于抗病毒药物疗效的判定.
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