【摘 要】
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目的:克隆羊流产嗜衣原体ompA基因,获得原核表达ompA蛋白.方法:以前期构建的质粒pMD -18T -ompA为模板,扩增出无信号肽无终止子ompA基因1101bp条带,亚克隆至原核表达载体pet
【机 构】
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贵州大学动物科学学院,贵州贵阳,550025贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州省动物疫病研究室,贵州贵阳550025;
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目的:克隆羊流产嗜衣原体ompA基因,获得原核表达ompA蛋白.方法:以前期构建的质粒pMD -18T -ompA为模板,扩增出无信号肽无终止子ompA基因1101bp条带,亚克隆至原核表达载体pet - 32a,转化大肠杆菌BL21( DE3),重组质粒稳定性测试合格后经1mmol/L IPTG诱导表达4h,并采用SDS-PAGE和Western - blot检测重组蛋白的表达结果.结果:本试验成功获得60kDa重组ompA蛋白,该重组蛋白主要以包涵体的形式存在,免疫印迹显示可与山羊流产嗜衣原体阳性血清反应,具有免疫原性.结论:成功建立ompA基因的原核表达方法,为后续ompA蛋白的功能研究奠定基础.
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