KiSS-1基因重组真核质粒的构建、鉴定及其表达

来源 :福建医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:conan_1126
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目的构建KiSS-1基因重组真核质粒,将其导入人高转移肝癌MHCC97-H细胞中,获得瞬时表达的细胞株,为进一步研究KISS-1基因对人肝癌细胞侵袭转移的影响奠定基础。方法Trizol试剂法提取新鲜胎盘组织总RNA,经RT—PCR扩增目的片段,PCR产物及真核表达载体分别双酶切后进行连接.并转化人大肠杆菌Ecoli.Dh5α扩增以获得重组载体,采用脂质体介导转染技术将高纯度的KiSS-1质粒转染到人高转移肝癌细胞株中,用RT—PCR和Westernblot技术加以鉴定。结果RT—PCR获得预期大小的特异性
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