【摘 要】
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目的探讨简便、快速定量检测氯霉素(CA)全抗原结合比的方法。方法以牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,采用混合酸酐法将之与氯霉素琥珀酸酯(CA-HS)偶联,合成CA-BSA全抗原。应用紫
【基金项目】
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广东省科技攻关计划项目(2006B20501005);广东省医学科学技术研究基金(A206323);广州市科技计划项目(2006JI-C0221)
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目的探讨简便、快速定量检测氯霉素(CA)全抗原结合比的方法。方法以牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,采用混合酸酐法将之与氯霉素琥珀酸酯(CA-HS)偶联,合成CA-BSA全抗原。应用紫外分光光度法对CA-BSA全抗原进行定性鉴定;分别采用自行改进的三硝基苯磺酸(TNBS)法和紫外分光光度法对CA-BSA全抗原结合比进行定量检测。结果紫外分光光度法检测显示CA-BSA的最大吸收峰高于相同蛋白浓度的BSA最大吸收峰,表明CA-BSA全抗原偶联成功。TNBS法测得的CA-BSA全抗原结合比为26,紫外分光光度法测得的CA-BSA全抗原结合比为23,两种方法的检测结果基本一致。结论TNBS法和紫外分光光度法用于氯霉素全抗原结合比的定量检测均具有快速、灵敏、方便和可靠的特点。TNBS法对半抗原在紫外区无吸收的全抗原结合比测定也可以胜任,因此适用范围更为广泛。
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