【摘 要】
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在对生长激素释放因子(GRF)基因改造和化学合成,并构建了其真核表达载体pcDNA3-GRF(1-32)的基础上.用Lipofectin将上述载体转染CHO细胞进行瞬时表达.提取转染细胞总RNA,用RT-
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在对生长激素释放因子(GRF)基因改造和化学合成,并构建了其真核表达载体pcDNA3-GRF(1-32)的基础上.用Lipofectin将上述载体转染CHO细胞进行瞬时表达.提取转染细胞总RNA,用RT-PCR和Dot blotting检测GRF基因的表达情况,用western blotting检测转染细胞上清液的表达产物,均得到了阳性结果.制备大鼠垂体单层细胞,测定表达产物的生物学活性,结果表达产物可刺激生长激素释放,并且比对照组提高3.8倍.试验结果表明,已构建的真核表达载体pcDNA3-GRF(1-32)能表达出有生物学活性的GRF.
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