【摘 要】
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为了解广西陆川猪肺炎支原体(Mhp)地方流行毒株的主要免疫原性表面蛋白基因P46的序列特征、基本结构及遗传变异等特点,试验以2011至2013年广西纯种陆川猪疑似猪支原体肺炎(MP
【机 构】
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广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室; 广西大学动物科学技术学院;
【基金项目】
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广西水产畜牧兽医局科研计划(桂渔牧科1304522、1204929、1204931);广西畜禽疫苗新技术重点实验室专项(12-071-28-A-5);广西科技攻关项目(桂科攻1123007-3)
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为了解广西陆川猪肺炎支原体(Mhp)地方流行毒株的主要免疫原性表面蛋白基因P46的序列特征、基本结构及遗传变异等特点,试验以2011至2013年广西纯种陆川猪疑似猪支原体肺炎(MPS)阳性病料为研究对象,抽提DNA进行PCR扩增,将克隆出与目的基因大小相符的片段回收,再与载体连接,转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中,筛选阳性克隆及测序,扩增获得4株Mhp毒株(GXLC1、GXLC2、GXLC3和GXLC4),随后用DNAStar软件对P46基因序列进行比对分析。结果表明,已克隆出的P46基因序列长度为1104bp,编码368个氨基酸,其中该序列中含有3个编码色氨酸的TGA密码子,而不是终止密码子;1个CGG为编码精氨酸的稀有密码子,而不是其他支原体中的无义密码子。所获得的4株Mhp毒株的P46基因序列与所参考的Mhp J株、232株、7448株及168株的核苷酸同源性为98.4%~99.4%,氨基酸同源性为98.6%~99.5%,毒株之间P46基因的同源性很高,保守性较强。
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