普萘洛尔对婴幼儿血管瘤内皮细胞增殖与凋亡的作用

来源 :中华小儿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blueblacktzb
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目的 研究普萘洛尔对体外培养的婴幼儿血管瘤内皮细胞(HemECs)增殖、凋亡的影响及其作用机制.方法 组织块法贴壁法原代培养、流式分选婴幼儿HemECs.采用Cell Counting Kit (CCK-8)法检测细胞活性变化,BrdU标记法检测细胞增殖状态.采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪术与Hoechst 33342荧光染色检测与观察细胞凋亡情况.应用Western印记法检测VEGF与bFGF表达,分光光度法检测Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9的相对活性.结果 与对照组相比,低剂量普萘洛尔(<50μmol/L)对HemECs的活性无明显影响,而100μmol/L普萘洛尔作用24 h能显著降低细胞活性至48%左右.100 μmol/L普萘洛尔作用24 h后,HemECs的增殖受到明显抑制,细胞早期凋亡(33.5±2.9)%较对照组的(10.7±3.2)%显著增高(P<0.01),出现典型的凋亡细胞核形态学变化.此外,普萘洛尔能显著抑制细胞内VEGF与bFGF的表达,激活凋亡蛋白Caspase-3与Caspase-9,而对Caspase-8活性无明显影响.结论 普萘洛尔对体外培养的HemECs具有明确的抗增殖、促凋亡作用,其机制可能与普萘洛尔抑制HemECs中VEGF与bFGF的表达、激活内源性凋亡通路有关。

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