表达VP3重组减毒沙门氏菌的构建和融合蛋白纯化

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寻求有效的肿瘤基因疗法,构建鸡贫血病毒VP3的减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗,并获得较纯的表达VP3基因的融合蛋白,初步研究其免疫原性。采用PCR技术扩增VP3基因,并将其与原核裁体pET32α(+)重组。将重组后质粒转染Ecoli BL21,得到表达VP3的融合蛋白,并将此蛋白通过50%的Ni+-NTA亲和树脂纯化。同时将重组质粒转染减毒沙门氏菌SL7207。经双酶切和PCR鉴定,成功构建了表达VP3的减毒沙门氏菌苗。融合蛋白通过50%的Ni+-NTA亲和树脂纯化,得到纯度在90%以上的纯化蛋白。成功构建了表达
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