猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素ⅢA基因的克隆及其在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yaojian42506

【摘要】

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应用PCR方法扩增猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（Actinabacillus pleuropneumoniae，App）编码毒素ⅢA结构蛋白的完整基因，连接到载体pMD18-T中，经NotI和SnabI双酶切后连接到用同样酶切的

【作者】

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汪招雄何启盖刘军发刘正飞陈焕春

【机构】

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长江大学动物科学学院,华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室

【出处】

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中国兽医学报

【发表日期】

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2007年6期

【关键词】

：

胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅢA基因 PICHIA PASTORIS 分泌表达 Actinabacillus pleuropneumoniae （APP） RTX

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（30200011）,农业结构调整重大技术研究专项资助项目（04-10-01A）

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应用PCR方法扩增猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（Actinabacillus pleuropneumoniae，App）编码毒素ⅢA结构蛋白的完整基因，连接到载体pMD18-T中，经NotI和SnabI双酶切后连接到用同样酶切的表达载体pPIC9k上，转化GS115酵母感受态细胞，经甲醇诱导表达了分泌到胞外的ApxⅢA蛋白。SDS-PAGE分析显示，表达的蛋白约为110000，与预期相符。Dot-blot和ELISA检测结果表明，表达蛋白具有良好的抗原性和特异性。为进一步研究ApxⅢA蛋白的结构和功能，研制A

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