【摘 要】
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目的：采用网络药理学和体外细胞实验研究枇杷清肺饮通过MAPK/NF-kB信号通路调控LPS诱导HaCaT细胞炎性损伤机制。方法：通过TCMSP数据库、GeneCards，OMIM和TTD数据库，取枇杷清肺饮和痤疮交集靶点，使用STRING数据库建立PPI网络，DAVID数据库筛选靶点GO功能和KEGG通路富集分析，Cytoscape软件构建“活性成分－靶点－KEGG－痤疮”网络，预测其作用机制。进
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（编号：81774023）； 辽宁省博士科研启动基金指导计划项目（编号：20170520183）； 沈阳市科技计划项目（项目编号：18-013-0-12）；
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目的：采用网络药理学和体外细胞实验研究枇杷清肺饮通过MAPK/NF-kB信号通路调控LPS诱导HaCaT细胞炎性损伤机制。方法：通过TCMSP数据库、GeneCards，OMIM和TTD数据库，取枇杷清肺饮和痤疮交集靶点，使用STRING数据库建立PPI网络，DAVID数据库筛选靶点GO功能和KEGG通路富集分析，Cytoscape软件构建“活性成分－靶点－KEGG－痤疮”网络，预测其作用机制。进一步采用细胞实验进行验证预测靶点的准确性，采用LPS诱导HaCaT细胞炎症模型，CCK8检测不同浓度枇杷清肺饮含药血清对细胞活力的影响，采用qPCＲ和ELISA技术检测HaCaT细胞IL-1β、AKR1B1、IL-4、TNF-α的mRNA及蛋白的表达水平，Western blot技术检测NF-KBP65、P38-MAPK和JNK-MAPK蛋白的表达水平。结果：通过网络分析可得知，6种中药包含153个活性成分共304个靶标，与痤疮共有靶标基因118个，关键靶点涉及于IL-1β、IL-4、TNF-α、AKR1B1等；GO功能富集分析得到条目1922个（P<0.05）；KEGG通路富集分析筛选到131条信号通路，其中有4条通路与炎症相关，分别为PI3K-Akt、MAPK、TNF信号通路和IL17信号通路。体外细胞实验结果显示，枇杷清肺饮能不同程度的抑制HaCaT细胞炎性模型中IL-1β、IL-4、TNF-α、AKR1B1mRNA及蛋白的表达，抑制P38-MAPK和JNK-MAPK的磷酸化，及NF-KBP65向细胞核内的转录。结论：枇杷清肺饮具有明显的抗炎作用，其机制可能通过作用于IL-1β、IL-4、TNF-α、AKR1B1等靶点调节NF-KB和MAPK信号通路有关。
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