GST—p16融合蛋白的表达、纯化及鉴定

来源 :哈尔滨医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：vincent1115

【摘要】

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目的利用GST融合基因表达系统表达、纯化及鉴定GST-p16融合蛋白.方法以质粒pM-p16为模板,扩增出p16基因片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-6P-1,将所构建的重组质粒pGEX-p

【作者】

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史从宁吕凤祥王天英郭卓维傅国辉

【机构】

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哈尔滨医科大学

【出处】

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哈尔滨医科大学学报

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

P16 GST融合基因表达系统 WESTERN BLOT p16 protein GST gene fusion system Western blot

【基金项目】

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国家自然科学基金

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目的利用GST融合基因表达系统表达、纯化及鉴定GST-p16融合蛋白.方法以质粒pM-p16为模板,扩增出p16基因片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-6P-1,将所构建的重组质粒pGEX-p16转化大肠杆菌BL21并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,所得产物进行SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果大肠杆菌细胞经诱导高效表达出约42kD蛋白,其分子量与GST-p16融合蛋白相符.Western blot结果显示该蛋白能够被p16抗体特异性识别.结论本实验在大肠杆菌表达系统中高

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