【摘 要】
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目的 观察细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在雌激素作用下的变化,探讨细胞内物质运输的改变在雌激素引发的乳腺癌细胞耐药中的意义.方法 分别以100 ng/ml 17β雌二醇(E2)处理MCF-7
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院乳腺甲状腺外科
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目的 观察细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在雌激素作用下的变化,探讨细胞内物质运输的改变在雌激素引发的乳腺癌细胞耐药中的意义.方法 分别以100 ng/ml 17β雌二醇(E2)处理MCF-7细胞,以Cdc42的小干扰RNA(siRNA) Stealth Select RNAiTM siRNA转染MCF-7细胞.采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞的药物敏感性,流式细胞术检测细胞内阿霉素(ADM)的蓄积量,实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞的Cdc42 mRNA表达,Western blot法检测细胞活化的Cdc42蛋白及总Cdc42蛋白表达量.结果 E2处理后,ADM对MCF-7细胞的半数抑制浓度(IC50)由(0.098±0.011) μg/ml增高到(0.134±0.130)μg/ml(P＜0.05),细胞内ADM的相对含量则由7.253±0.310下降为3.233±0.313(P＜0.05),而Cdc42 mRNA、活化Cdc42蛋白及总Cdc42蛋白的表达量均显著增加(P＜0.05).Cdc42 siRNA转染后,ADM对MCF-7细胞的IC50下降到(0.057±0.017)μg/ml(P＜0.05),细胞内ADM的相对含量增高为11.217±0.521(P＜0.05),而Cdc42 mRNA、活化Cdc42蛋白及总Cdc42蛋白则均有显著下降(P＜0.05).结论 雌激素可以诱导乳腺癌细胞耐药性增强,其机制可能是通过上调Cdc42基因的转录、表达和活化,加速胞内物质运输速度,使得化疗药物无法在细胞内聚集.
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