【摘 要】
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目的人工设计合成完整的人心肌肌钙蛋白Ⅰ(hcTnI)基因,克隆并在大肠杆菌中获得高效表达.方法根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性,人工设计合成hcTnI基因,测序正确后通过DNA重组技
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目的人工设计合成完整的人心肌肌钙蛋白Ⅰ(hcTnI)基因,克隆并在大肠杆菌中获得高效表达.方法根据大肠杆菌遗传密码的偏爱性,人工设计合成hcTnI基因,测序正确后通过DNA重组技术将其插入温控型表达载体pBV220,转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,构建cTnI基因的非融合表达菌hcTnI-pBV220/DH5α,热激后诱导非融合蛋白的表达,用单克隆抗体检测特异性hcTnI蛋白表达.结果序列分析表明克隆载体中的cTnI人工基因与设计相符,双酶切电泳结果证明表达载体构建成功,经SDS-PAGE证实重组蛋
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