【摘 要】
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目的 探讨金黄色葡萄球菌SaeRS二元调控系统在人血浆蛋白调控细菌凝集和生物被膜形成中的作用机制.方法 收集金黄色葡萄球菌感染常见的临床克隆菌株,Newman(NM)菌株中由于SaeS第一个跨膜区点突变(L18P)导致SaeRS二元调控系统处于持续活化状态,为了探索不同菌株中SaeRS系统的调控功能,本研究分别以USA300和NM菌株为背景,构建SaeRS二元调控系统敲除菌株USA300Δsae和NMΔsae,在含有乏血小板血浆(PPP)和富血小板血浆(PRP)条件下分别检测不同菌株凝集和生物被膜形成的能
【机 构】
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上海交通大学医学院附属仁济医院检验科,上海 310115;上海交通大学附属第六人民医院检验科,上海 201306;上海交通大学医学院附属仁济医院检验科,上海 310115
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目的 探讨金黄色葡萄球菌SaeRS二元调控系统在人血浆蛋白调控细菌凝集和生物被膜形成中的作用机制.方法 收集金黄色葡萄球菌感染常见的临床克隆菌株,Newman(NM)菌株中由于SaeS第一个跨膜区点突变(L18P)导致SaeRS二元调控系统处于持续活化状态,为了探索不同菌株中SaeRS系统的调控功能,本研究分别以USA300和NM菌株为背景,构建SaeRS二元调控系统敲除菌株USA300Δsae和NMΔsae,在含有乏血小板血浆(PPP)和富血小板血浆(PRP)条件下分别检测不同菌株凝集和生物被膜形成的能力.采用反转录-聚合酶链反应检测不同菌株在PPP作用后其SaeRS二元调控系统调控的靶基因表达水平.结果 人血浆PPP可促进金黄色葡萄球菌不同临床分离菌株凝集,人血浆PPP和PRP均可促进金黄色葡萄球菌不同临床分离菌株生物被膜形成,但不同菌株之间存在差异,如人血浆蛋白促进NM菌株凝集能力明显强于USA300菌株,提示NM菌株中SaeRS系统的高度活化状态可能参与血浆蛋白促进细菌的凝集过程.进一步研究发现,人血浆蛋白不能促进sae敲除菌株的凝集和生物被膜形成能力;sae敲除菌株中互补表达SaeRS和高度活化状态的SaeRS L18P均可回复人血浆蛋白促进细菌凝集活性;USA300菌株中SaeRS通过调控凝固酶coa表达促进金黄色葡萄球菌凝集和生物被膜形成,而在NM菌株中,高度活化的SaeRS二元调控系统通过调节多个基因(coa、eap、clfb、emp)的表达发挥功能.结论 人血浆蛋白可促进金黄色葡萄球菌凝集和生物被膜形成,SaeRS二元调控系统单个氨基酸位点突变改变该系统的调控网络.
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