无标签NT—proBNP重组蛋白的获得及多克隆抗体的制备

来源 :临床检验杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：vincent_iong

【摘要】

：

目的通过原核表达，获得不带标签的NT—proBNP重组蛋白，并用其免疫新西兰大白兔，制备兔抗NT—proBNP抗体。方法从重组菌pET-32a（＋）-NT．proBNP提取重组质粒，通过PCR扩增出目的DNA片段，插

【作者】

：

谌海兰陈曦徐绣宇谢佳瑛刘宇思赵家宁曾令斌陈特

【机构】

：

重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆医科大学附属第一医院检验科

【出处】

：

临床检验杂志

【发表日期】

：

2012年11期

【关键词】

：

N末端B型钠尿肽原原核表达蛋白质纯化多克隆抗体 N-terminal pro-B-type natriuretic peptide prokaryoti

【基金项目】

：

基金项目：重庆市教委课题（KJl20318）.

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

目的通过原核表达，获得不带标签的NT—proBNP重组蛋白，并用其免疫新西兰大白兔，制备兔抗NT—proBNP抗体。方法从重组菌pET-32a（＋）-NT．proBNP提取重组质粒，通过PCR扩增出目的DNA片段，插入pColdTF载体，转化入大肠埃希菌BL21（DE3），经IPTG诱导表达融合蛋白。经镍柱亲和纯化、HRV3C蛋白酶酶切、镍柱亲和纯化，制备不带标签的纯蛋白质，并用临床商品化试剂盒验证其抗原性。用该蛋白质免疫新西兰大白兔制备抗体，westernblot鉴定其特异性。结果成功获得高纯度的不带标

其他文献

UF-1000i尿液分析仪细菌计数在筛查儿童尿路感染中的应用

尿路感染是婴幼儿时期常见疾病,病原体主要是细菌,也可为真菌。尿路感染实验室诊断的金标准是中段尿细菌培养,但耗时长,成本高。UF-1000i尿液有形成分分析仪有单独的细菌通道

期刊

儿童尿路感染培养

90—2500公里大气密度经验计算模式

本文采用最小二乘法,对各种不同环境温度下给定的随高度而变化的大气密度进行拟合,从而得到了在任何高度和环境温度下计算大气密度的最佳经验公式。

期刊

大气密度最小二乘法计算模式

艾滋病患者外周血培养出马尔尼菲青霉菌1例

我科于2012年3月16日在1例艾滋病患者外周血涂片镜检时发现中性粒细胞胞浆内吞噬有真菌样物,疑为马尔尼菲青霉菌,后经血培养证实。现报告如下。

期刊