【摘 要】
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目的构建编码胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)α亚单位基因的重组真核表达质粒。方法根据GenBank中人IGF-1Rα亚单位基因编码序列设计并合成引物,用TRIzol一步法从Graves病患者甲状腺组织中提取总RNA,逆转录成cDNA并将其作为模板,PCR扩增获得IGF-1Rα亚单位编码基因片段。胶回收纯化后再与pcDNATM3.1D/V5-His-TOPO载体通过拓扑克隆连接,用热休克法将重组质粒转入大肠杆菌,在含有氨苄青霉素培养基中筛选阳性克隆。用碱裂解法提取IGF-1Rα-
【基金项目】
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国家自然科学基金青年科学基金(81601523),天津市卫生健康科技项目(ZC20181),天津医科大学总医院青年孵育基金(ZYYFY2019027),中国健康促进基金会甲状腺中青年医生项目。
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目的构建编码胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)α亚单位基因的重组真核表达质粒。方法根据GenBank中人IGF-1Rα亚单位基因编码序列设计并合成引物,用TRIzol一步法从Graves病患者甲状腺组织中提取总RNA,逆转录成cDNA并将其作为模板,PCR扩增获得IGF-1Rα亚单位编码基因片段。胶回收纯化后再与pcDNATM3.1D/V5-His-TOPO载体通过拓扑克隆连接,用热休克法将重组质粒转入大肠杆菌,在含有氨苄青霉素培养基中筛选阳性克隆。用碱裂解法提取IGF-1Rα-
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