【摘 要】
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目的 在遗传背景为APP/PS1(APP/PS1+)的阿尔兹海默病模式基础上对SCN2B基因进行敲除(SCN2B-/-)、敲低(SCN2B+/-)或过表达(SCN2B+/+),构建APP/PS1+SCN2B-/-、APP/PS1+SCN2B+/-以及APP/PS1+SCN2B+/+三种品系转基因小鼠,探究SCN2B在APP加工处理及Aβ产生过程中的可能作用.方法 将阿尔兹海默病模式动物APP/PS1+小鼠分别与SCN2B-/-、SCN2B+/-及SCN2B+/+三种转基因小鼠杂交并获得稳定转基因品系.运用
【机 构】
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昆明医科大学 基础医学院神经科学研究所,云南 昆明 650500
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目的 在遗传背景为APP/PS1(APP/PS1+)的阿尔兹海默病模式基础上对SCN2B基因进行敲除(SCN2B-/-)、敲低(SCN2B+/-)或过表达(SCN2B+/+),构建APP/PS1+SCN2B-/-、APP/PS1+SCN2B+/-以及APP/PS1+SCN2B+/+三种品系转基因小鼠,探究SCN2B在APP加工处理及Aβ产生过程中的可能作用.方法 将阿尔兹海默病模式动物APP/PS1+小鼠分别与SCN2B-/-、SCN2B+/-及SCN2B+/+三种转基因小鼠杂交并获得稳定转基因品系.运用PCR技术检测品系小鼠基因型,qRT-PCR、Western blot检测SCN2B基因在各品系小鼠脑中的表达量.挑选出适龄转基因阳性小鼠获取脑皮质与海马组织进行神经元代培养,ELISA检测神经元中的Aβ40和Aβ42在脑皮质海马中的表达含量,Western blot检测APP-APPβ-CTF、sAPPα、sAPPβ 蛋白含量.结果 与APP/PS1+SCN2B-/-、APP/PS1+SCN2B+/-两组相比,APP/PS1+SCN2B+/+组中Aβ40和Aβ42蛋白表达增加(P<0.05);sAPPα,sAPPβ蛋白表达随SCN2B蛋白的表达升高而减少(P<0.05);而APP-APPβ-CTF与AICD的蛋白表达随SCN2B蛋白的表达升高而增加(P<0.05).结论 SCN2B基因过表达能促进APP向产生Aβ40和Aβ42片段的分解过程;促进APP分解为致病性的APP-APPβ-CTF及AICD,减少其向水溶性可代谢的sAPPα片段分解,进而部分阐明SCN2B在APP加工处理及Aβ产生中的作用.
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