旋毛虫Ts43基因的克隆与原核表达

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:clin_789
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目的构建旋毛虫Ts43基因原核表达载体,并且在大肠埃希菌中表达。方法将构建的pMD-Ts43克隆质粒酶切回收目的片段定向克隆到pET-28a(+)载体上,构建原核表达载体pET-28a—Ts43,酶切鉴定正确后,导入菌株Rosetta中,用IPTG诱导表达,并经SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果成功构建了含目的基因的原核表达质粒pET-28a—Ts43,IPTG诱导表达分子质量单位约为43ku的融合蛋白,与预测值相符。以0.9mmol/LIPTG诱导4.5h后表达量最高,薄层扫描表达的融
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